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圖1 微球顯微照片（標(biāo)尺每小格為10μm） 1實(shí)驗(yàn)部分 1.1原料及設(shè)備 原料：SCA CG 550, CG 560，優(yōu)級(jí)，南京辰工有機(jī)硅材料有限公司；HP-β-CD山東濱州智源科技有限公司；HP-MC藥用級(jí)，杭州普修科技有限公司；乙醇分析醇AR，密度0.789~0.791g/m3,含量99.7%，上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；聚乙二醇PEG6000，化學(xué)純，上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；司盤80上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；液體石蠟化學(xué)純，上海凌峰化學(xué)試劑有限公司。 設(shè)備：實(shí)驗(yàn)室常規(guī)設(shè)備玻儀，攪拌裝置，離心機(jī)，三頸瓶，恒溫水浴鍋。光學(xué)顯微鏡RS-7130EDIGITAL CAM TYU-50，上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，精密天平 WETTLERTOLEDO，梅特勒托利多公式 支架10M/D15TIP RW 20 DZM.n，IKALABORTECHNIK廣州公司 超聲波粉碎儀KQ218，江蘇昆山市超聲儀器有限公司。 原料配比：基于2L反應(yīng)瓶容量，擬用SCA10g，(KH550和KH560各5g)，HP－β－CD4g以下，(過(guò)量在乳液中難分散)。乙醇和水的量以復(fù)合乳液中第一分散系連續(xù)相對(duì)分散質(zhì)SCA相容積比 74%，(分散質(zhì)SCA體積分?jǐn)?shù)0.24，)形成水包油(O/W)，設(shè)定乙醇溶液質(zhì)量濃度78%，計(jì)算出需乙醇18g，水5g。加入適量表面活性劑司盤80，用聚乙二醇PEG6000和羥丙基纖維素HP－MC為分散劑和助分散劑。實(shí)驗(yàn)用水為去離子水，本案用醫(yī)用透析水。 1.2微球制備 方法： 固定攪拌裝置，2L容量三頸瓶?jī)?nèi)置2000mL液體石蠟，加入20g司盤80，置于水浴鍋中（混合冰水6- 10℃），水面齊瓶?jī)?nèi)油面。 稱取干燥至恒重的HP-β-CD4g，KH550、KH560各5g，三者混合搖勻，加入約4g（計(jì)量）無(wú)水乙醇稀釋至流動(dòng)性好，置旋轉(zhuǎn)支架上（100r/min）反應(yīng)至完全透明如蜜狀，SCA水解即完成。 稱取PEG60000.3g，水5g，乙醇補(bǔ)足18g（減去前面用量），混合搖勻。啟動(dòng)攪拌裝置（333r/min）將溶液與水解后的乳液充分混合搖勻，傾入三頸瓶中開(kāi)始聚合反應(yīng)，反應(yīng)時(shí)間約3h（精確時(shí)間以顯微鏡觀察為準(zhǔn)）。反應(yīng)完成后用室溫水置換水浴鍋中冰水，靜置4h，二次開(kāi)機(jī)再攪拌4h使沉淀聚集的珠體分散。停機(jī)后再沉降，然后分離出油相，配合用100W小超聲儀處理，用無(wú)水乙醇洗滌十次以上，洗凈表面石蠟油后自然晾干即制得白色粉末狀的聚硅氧烷環(huán)糊精復(fù)合微球。成品約6g。 1.3 兩個(gè)不同條件下的制備案例 案例1：室溫28℃，相對(duì)濕度86%，水浴8℃，HP-β-CD3.9964 g，KH5504.9835 g，KH560 5.0076 g；乙醇4.0946g，水解反應(yīng)18h。PEG6000 0.3334 g，水5.0260g，乙醇13.8939g（總量17.9885g，按18g計(jì)算）。聚合反應(yīng)2.5h，后續(xù)處理如前述。 案例2：在配比常量基礎(chǔ)上加入羥丙基纖維素HP-MC0.2 g，冬季室溫9℃，相對(duì)濕度76%，水解反應(yīng)144h（六天中氣溫和濕度有變化），空調(diào)下室溫25℃，濕度65%，水浴8C°，聚合反應(yīng)3h，后續(xù)處理同上。 制備案例表明：反應(yīng)環(huán)境溫度和空氣濕度與微球制備的關(guān)系密切。水解反應(yīng)所需的水來(lái)自空氣，故此過(guò)程歷時(shí)數(shù)小時(shí)乃至數(shù)天不等，視室溫和空氣濕度而變。對(duì)于聚合反應(yīng)，溫度較高且相對(duì)濕度小時(shí)液滴很容易粘結(jié)；低溫，高濕度液滴不易粘結(jié)，但氣溫低時(shí)空氣中會(huì)有較多的水進(jìn)入反應(yīng)釜被液滴吸收，使形成的凝珠碎裂。顯微鏡下可見(jiàn)月牙、半圓形碎片。最宜條件是室溫25—30°C，相對(duì)濕度50%—80%。憑多次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)推斷當(dāng)攪拌速度與其它因素（原料及分散劑用量，水浴溫度，相容積比等）一定時(shí)，聚合反應(yīng)時(shí)間與實(shí)驗(yàn)室溫度、空氣濕度三者間可能存在某種函數(shù)關(guān)系，有待深 入研究。 2.包合藥物及釋放 2.1 包合藥物 用飽和水溶液法，稱取適量鹽酸表柔比星與微球（量比小于1:1）混合，加入蒸餾水50g左右，用100W超聲粉碎儀處理十次以上，置攪拌裝置48h后再離心處理（3000r/min）,然后用無(wú)水乙醇多次洗滌至沉降后上清溶液紅色不再析出。分離出沉淀物，干燥制得紅色載藥微球（圖2）。 （a）100倍 （b）250倍 圖2 載藥微球照片 2.2載藥案例 案例1：用制備案例一的微球0.1068g，鹽酸表柔比星0.1026g，上述方法制得干燥藥珠0.1821g。得率0.87，包合藥物0.0753g（減法計(jì)算），載藥率41%，包封率73%。 案例2：用制備案例2的微球（組分含HP－MC）0.0352g，鹽酸表柔比星0.0348g，制得載藥珠0.0656g。得率93.7%，包合藥物0.0304g（減法計(jì)算），載藥率46.3%，包封率87%。 2.3 藥物釋放 將上2種紅色藥珠分別加入適量蒸餾水混合搖勻后自然沉降，水慢慢變紅，顯示包合的表阿霉素緩慢釋放。吸出上清紅色水置換清水，重復(fù)操作，幾天后水仍呈淺紅色，顯示仍有藥物析出。觀察表明組分中有HP-MC的微球有溶脹性，體積明顯增大，藥物在蒸餾水里溶出更快，溶液呈深紅色，提示HP-MC的量可以改變藥物的吸收和釋放率。載藥微球放置1年后則釋放極少，溶液略顯很淺的粉色。藥物釋放實(shí)驗(yàn)建議用生理鹽水。 2.3載藥微球小鼠試驗(yàn) 用包敷鹽酸表阿霉素(表柔比星)的微球做了一次小白鼠腫瘤治療試驗(yàn)。用4只小白鼠，2只患肝癌，2只腹水瘤，同病體征相當(dāng)，分2組，2種病各1只，分別用表阿霉素原藥和載藥微球注射治療，對(duì)照治療后小鼠的存活期，初步比較兩種不同方法的療效。結(jié)果顯示與阿霉素原藥相比，載藥微球?qū)Ω顾鲂∈蟑熜c原藥相當(dāng)，對(duì)肝癌效果不及原藥。實(shí)驗(yàn)于2015年8月由浙江省藥物研究所所長(zhǎng)鄭高利教授主持。送試載藥微球1.6727g，含鹽酸表阿霉素9%，制備日期2014年4月。雖然實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想，但表明對(duì)于聚硅氧烷環(huán)糊精微球載藥的醫(yī)學(xué)應(yīng)用可以寄予一定的期望值。 3小結(jié) 溶液.凝膠－反相懸浮聚合的方法制備微球技術(shù)的關(guān)鍵是聚合反應(yīng)時(shí)間的掌控。作者獨(dú)辟蹊徑用顯微鏡觀察找到精準(zhǔn)控制時(shí)間的密鑰。用此方法制備出具有合成單體功能的復(fù)合微球。聚硅氧烷有穩(wěn)定的物理力學(xué)性能和良好的生物親和性，而環(huán)糊精分子的疏水空腔能包合某些小分子藥物并緩慢釋放。制得的微球粒徑1~10μm，大小較均勻，球形度和分散性好，不降解，能達(dá)到醫(yī)學(xué)上對(duì)藥物載體的要求。制備方法簡(jiǎn)單，安全環(huán)保，反應(yīng)介質(zhì)石蠟油可回收利用。S.G-S.B法制備微球有一定參考價(jià)值，謹(jǐn)此自薦。
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第一作者簡(jiǎn)介：浦炳寅（1944），男，教授，主要研究方向：分析化學(xué) 圖在另外的帖子里
聚硅氧烷環(huán)糊精功能復(fù)合微球的制備與載藥初探 2 | 
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